小动物活体成像
小动物活体成像是在生物体处于正常生理的活体状态下,利用生物发光(荧光素酶基因(Luciferase)标记细胞或DNA)或荧光标记(绿色荧光蛋白、红色荧光蛋白等荧光报告基因和FITC、Cy5、Cy7等荧光素及量子点(quantumdot,QD)进行标记)方式,结合高量子效率CCD,对小动物进行成像和分析,观察被标记动物体内分子、细胞等变化,可真实模拟生理病理状态下的生物学变化过程。
1. 荧光发光成像
荧光成像的标记对象较为广泛,可以是动物、细胞、微生物、基因,也可以是
抗体、药物、纳米材料等。常用的有绿色荧光蛋白( GFP)、红色荧光蛋白( DsRed)及其它荧光报告基团,标记方法与体外荧光成像相似,荧光成像具有费用低廉和操作简单等优点。同生物发光在动物体内的穿透性相似,红光的穿透性在体内比蓝绿光的穿透性效率高,近红外荧光为成像观察的**选择。
2. 生物发光成像
活体生物荧光成像技术是指在小的哺乳动物体内利用报告基因-荧光素酶基因表达所产生的荧光素酶蛋白与其小分子底物荧光素在氧、Mg2+离子存在的条件下消耗ATP发生氧化反应,将部分化学能转变为可见光能释放。然后在体外利用敏感的CCD设备形成图像。荧光素酶基因可以被插入多种基因的启动子,成为某种基因的报告基因,通过监测报告基因从而实现对目标基因的监测。