大鼠皮肤损伤模型
1.1动物模型建立及实验分组:SPF级 Wistar/SD大鼠18只。体重0.20—0.25kg,雌雄各半,购自医科大学实验动物
实验前1周实验室喂养,实验当天禁食,3%戊巴比妥钠30mg/kg腹腔内注射麻醉,以8%硫化钠在大鼠背部积9cmx8cm,然后用特制致伤器(打孔器)在背中部脊侧旁开1.5cm,共切割4个圆形溃疡,直径1.8cm.面积2.54cm,深至皮下,止血后备用。
18只大鼠共制备溃疡72个,随机将溃疡分为3组:
L凝胶剂治疗组(A组)、凝胶基质对照组(B组)、空白对照组(C组),每组24个溃疡(12个用于观察溃疡面积愈合情况,12个用于组织取材切片)
1.2药物及用药方法:L凝胶剂(含L)、凝胶基质(不含L)均为自制药品
各组均予造模后第二天开始用药,
A组给予L凝胶剂,同等量的基质用于B组,将药物均匀单层涂于相应溃疡面,用无菌凡士林油纱及纱布包扎,单笼喂养,每日换药1次,至伤后14天
C组不予用任何药,其余处理同A、B组。
喂全价颗粒饲料每只30g/d.自由饮水,每3日更换垫料。
1.3评价指标
1.3.1血糖测定:随机抽取其中的12只大鼠,于首次涂用L凝胶剂前30min及治疗后1、2、3、4、6、8h取大鼠尾静脉血,用便携型血糖仪检测血糖浓度。
1.3.2溃疡面积:于伤后第3、7、10、14天溃疡面照相,用透明膜覆盖溃疡面沿创缘描记、剪膜,置分析天平称取质量换算面积,观察溃疡愈合情况。
1.3.3组织病理学检査:于伤后第3、7、10、14天取溃疡创面组织,经10%福尔马林液固定、脱水、石蜡包埋,进行苏伊红巸)染色,光镜下重点观察溃疡面肉芽组织生长(包细血管生长、胶原沉积)以及再上皮化情况,以评价愈合效
1.4 bBGF免疫组化
1.4统计学处理:应用SPSS13.0统计软件包处理,实验数据以均数±标准差±s)表示,采用方差分析,组问两两比较采用LSD法,P〈0.05为有统计学意义